На правах рукописи





БАБКИН
Андрей Валериевич





КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПОЗДНИХ
КОЖНЫХ ПРОЯВЛЕНИЙ ИКСОДОВОГО КЛЕЩЕВОГО БОРРЕЛИОЗА В
СЕВЕРО-ЗАПАДНОМ РЕГИОНЕ РОССИИ






14.00.11 – кожные и венерические болезни





АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук









САНКТ-ПЕТЕРБУРГ

1998 Работа выполнена в Военно-медицинской академии


Научный руководитель:

доктор медицинских наук профессор САМЦОВ А.В.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук Бурыкина Г.Н.
доктор медицинских наук Королькова Т.Н.


Ведущее учреждение:

Центральный научно-исследовательский кожно-венерологический институт МЗ РФ

Защита диссертации состоится << >> 1998 года
в часов на заседании специализированного диссертационного совета Д 106.03.05. в Военно-медицинской академии (194044, г.Санкт-Петербург, ул. Лебедева 6)


С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Военно-медицинской академии

Автореферат разослан << >> 1998 года



Ученый секретарь диссертационного совета
доктор медицинских наук профессор
Ляшенко Юрий Иванович









ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность изучения поздних кожных поражений при иксодовом клещевом боррелиозе (ИКБ) определяется широким нозоареалом этой инфекции и неуклонным ростом уровня заболеваемости (Ананьева Л.П. с соавт., 1990; Коренберг Э.И., 1993 ; Лобзин Ю.В. с соавт., 1996; White D.J. et al., 1991). Иксодовый клещевой боррелиоз (болезнь Лайма) по показателям заболеваемости в России занимает одно из первых мест среди всех природно-очаговых трансмиссивных зоонозов, ежегодно в стране возникает 5-10 тысяч новых случаев ИКБ (Коренберг Э.И., 1993). Северо-Запад России относится к высоко эндемичным регионам по клещевому боррелиозу, в природных очагах которого зараженность переносчиков колеблется от 30 до 90 % (Деконенко Е.П. с соавт., 1993; Антыкова Л.П. с соавт., 1993; Козлов С.С. с соавт.,1994). Ежегодно, только в Ленинградской области регистрируются более 500 новых случаев заражения ИКБ. По показателям заболеваемости эта инфекция занимает одно из первых мест среди всех трансмиссивных природно-очаговых зоонозов (Деконенко Е.П. с соавт., 1993; Скрипникова И.А. с соавт., 1992 г.; Кравчук Л.Н. с соавт., 1992 г.). Недавнее открытие возбудителя (Burgdorfer W. et al., 1982) и последующая идентификация множества его геновидов (Wang G.еt al.,1997; Fleche A. et al., 1997; Postic D., et al., 1997) обуславливают недостаточную изученность патогенеза, клинических проявлений, методов диагностики и лечения кожных поражений при ИКБ. Являясь изначально острой инфекционной патологией, ИКБ в последующем, даже на фоне проводимой этиотропной терапии, склонен к хронизации с поражением различных органов и систем, в том числе и кожи. Вместе с тем, причиной хронизации инфекционного процесса могут быть позднее обращение за медицинской помощью, возможность длительной персистенции возбудителя в организме человека, возникновение новых антигенных вариантов боррелий, стойкое сохранение вторичного иммунодефицита (Усков А.Н., 1993; Стир А.К., 1995; Dressler F., et al., 1991;Kalish R.F. et al., 1993). В настоящее время в Европе различные формы очаговой склеродермии, атрофодермия Пазини-Пьерини, анетодермия, хронический атрофический акродерматит связывают с боррелиозной инфекцией. Этиологическая связь этих поражений кожи с ИКБ подтверждается обнаружением и культивированием боррелий из очагов поражения, наличием специфических антител в крови больных, а также положительным эффектом антибактериальной терапии. (Malane M., et al., 1991; Schempp C., et al., 1993; Ohlenbusch A., et al., 1996; Fujiwara H.,et al., 1997). Исследования последних лет показывают, что причина возникновения этих заболеваний связана с длительной персистенцией B.afzelii и B.garinii в коже (Ohlenbusch A., et al., 1996; Busch U., et al., 1996; Fujiwara H., et al., 1997). В Америке боррелиозная этиология очаговой склеродермии не доказана (Weixin F., et al., 1995; De-Vito J.R., et al., 1996). Возможно, эти различия можно объяснить гетерогенностью в антигенном отношении штаммов боррелий, выделенных в Европе, в отличие от американских штаммов (Fujiwara H., et al., 1997). В России клиника поздних кожных поражений ИКБ до сих пор остается не изученной. Важность правильной диагностики этих форм, своевременное назначение антибиотиков в комплексной терапии, предупреждающее рецидивы заболеваний и развитие осложнений, побудило нас исследовать роль боррелиозной инфекции в возникновении этих заболеваний и изучить клинические особенности кожных поражений на поздних стадиях развития этой инфекции. Целью исследования явилось изучение роли боррелиозной инфекции в развитии очаговой склеродермии, атрофодермии Пазини-Пьерини, анетодермии, хронического атрофического акродерматита в Северо-Западном регионе России. Задачи исследования: 1.         Изучить клинические особенности поздних кожных проявлений при иксодовом клещевом боррелиозе в Северо-Западном регионе России и оценить состояние клеточного и гуморального звеньев иммунной системы у таких больных. 2.         Показать диагностическую значимость различных лабораторных методов для подтверждения боррелиозной этиологии очаговой склеродермии, анетодермии, атрофодермии, хронического атрофического акродерматита. 3. Оценить терапевтическую эффективность различных антибактериальных препаратов в комплексной терапии при поздних кожных проявлениях иксодового клещевого боррелиоза, разработать адекватные схемы этиопатогенетического лечения, принципы динамического клинико-серологического наблюдения. Научная новизна. Впервые в кожных поражениях у больных очаговой склеродермией, атрофодермией Пазини-Пьерини, анетодермией в России обнаружены боррелии методом серебрения (по Левадити). Впервые у больных с поздними кожными поражениями иксодового клещевого боррелиоза выявлено снижение абсолютного количества лимфоцитов, теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов, функции Т-лимфоцитов в РТМЛ с ФГА и КонА, повышение количества теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, IgG, IgA, определена специфическая сенсибилизация лимфоцитов в реакции торможения миграции лейкоцитов с боррелиозным антигеном. Практическая значимость работы. Дана клиническая характеристика поздних кожных поражений, характерных для иксодового клещевого боррелиоза. Установлена диагностическая ценность непрямой реакции иммунофлюоресценции (НРИФ) с боррелиозным антигеном, реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) с боррелиозным антигеном для доказательства боррелиозной этиологии различных форм очаговой склеродермии, анетодермии, атрофодермии, хронического атрофического акродерматита. Разработаны дифференцированные схемы этиопатогенетической терапии у больных с поздними кожными поражениями иксодового клещевого боррелиоза. Показана необходимость длительного (не менее года) клинико-серологического наблюдения за пациентами, получавшими специфическое лечение, с привлечением инфекционистов, невропатологов и терапевтов. Основные положения выносимые на защиту: 1.         Атрофодермия Пазини-Пьерини, анетодермия, большая часть различных форм очаговой склеродермии (до 60 %), представляют собой кожные поражения поздних стадий развития иксодового клещевого боррелиоза. У части больных обнаруживаются астено-вегетативный синдром (31,9%), поражение опорно-двигательного аппарата (12,5%), нервной системы (12,5%), сердца (5,6%). 2.         Клиническими особенностями дерматозов боррелиозной этиологии среди больных Северо-Западного региона России являются распространенность кожного процесса, наличие у одних и тех же пациентов очагов на разных стадиях развития, длительное течение с периодами ремиссий и обострений, приводящее к атрофии кожи. У некоторых больных обнаруживается сочетание различных форм кожных проявлений ИКБ (очаговая склеродермия с атрофодермией, анетодермия с лимфоцитомой кожи). 3. Комплексная этиопатогенетическая терапия дерматозов боррелиозной этиологии должна включать антибиотики (пенициллин, доксициклин, препараты фторхинолоновой группы или цефалоспорины), иммунорегуляторы, а также другие патогенетические средства (сосудистые препараты, витамины А, Е, С). С целью оценки эффективности лечения и предупреждения рецидивов пациенты с дерматозами боррелиозной этиологии нуждаются в динамическом клинико-серологическом наблюдении в течение года после лечения. Реализация работы. Результаты работы используются в учебном процессе и лечебно-дигностической практике кафедры и клиники кожных и венерических болезней ВМедА. Основные научно-практические положения диссертации включены в тематический план преподавания для слушателей I, VI факультетов и курсантов академии. Проведенная работа является разделом НИР "Эпидемиология, диагностика, клиника, лечение, диспансерное наблюдение, военно-врачебная экспертиза и профилактика клещевых боррелиозов в Вооруженных Силах РФ" (шифр: 3.95.072.п.4), проводимой на кафедрах общей и военной эпидемиологии, микробиологии, инфекционных болезней, кожных и венерических болезней, биологии (с курсом паразитологии), нервных болезней и военно-морской и общей терапии Военно-медицинской академии. Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на заседании Санкт-Петербургского научного медицинского общества дерматовенерологов им. В.М.Тарновского (Санкт-Петербург, 1994 и 1997); на заседании Санкт-Петербургского общества паразитологов (Санкт-Петербург, 1994); на научной конференции "Актуальные вопросы медицинской паразитологии", посвященной 110-летию со дня рождения академика Е.Н.Павловского (Санкт-Петербург, 1994); на заседании Санкт-Петербургского медицинского общества инфекционистов (Санкт-Петербург, 1995); на ХХХII городской научно-практической конференции дерматовенерологов, акушер-гинекологов и урологов (Санкт-Петербург, 1997), на клинических конференциях кафедры и научных конференциях для слушателей факультета подготовки врачей ВМедА. Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ (из них 1 за рубежом). Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 131 странице машинописного текста и состоит из введения, 6-и глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, включающего 294 источник, в том числе 110 отечественных и 184 зарубежных авторов. Текст иллюстрирован 15 таблицами и 12 рисунками. СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ. Клиническая характеристика больных. С 1991 по 1997 год под нашим наблюдением находились 120 больных с различными кожными проявлениями ИКБ. Все больные были разделены на две группы. Основную группу (72 человека) составили пациенты с дерматозами, которые могут рассматриваться как характерные поздние проявления иксодового клещевого боррелиоза. С очаговой склеродермией наблюдалось 50 человек (диссеминированная бляшечная форма - у 43 больных, в виде одиночного очага – у 3, линейная – у 4 больных), атрофодермией Пазини-Пьерини - 10 человек, анетодермией - 9 человек, хроническим атрофическим акродерматитом - 3 человека. Из них было 42 женщины и 30 мужчин в возрасте от 8 до 79 лет. Длительность заболевания при очаговой склеродермии составляла от 6 месяцев до 6 лет, при атрофодермии Пазини-Пьерини – от 4 месяцев до 8 лет, при анетодермии от 6 месяцев до 6 лет, при ХААД – от 2 до 6 лет. Укус клеща в анамнезе отмечали 40% больных основной группы. В ходе клинического обследования у больных этой группы были выявлены астено-вегетативный синдром ( 31,9%), признаки поражения опорно-двигательного аппарата (артралгии, артрит) (12,5%), нервной системы (энцефалопатия, радикулоневрит) (12,5%), сердца (миокардит,нарушения проводимости) – (5,6%). В качестве сравнительной группы наблюдали 48 человек с мигрирующей эритемой Афцелиуса-Липшютца (больные с ранним типичным клиническим маркером иксодового клещевого боррелиоза). Из них 28 женщин и 20 мужчин в возрасте от 20 до 64 лет. Длительность заболевания составляла от 1 до 6 месяцев. Укус клеща в анамнезе отмечали 50% больных. У 63% больных обнаруживалась региональная лимфаденопатия, у 50% больных отмечался синдром общей инфекционной интоксикации. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Для изучения клинических проявлений ИКБ, результатов лабораторного и инструментального обследования использован метод заполнения формализованных карт на каждого больного, в которых регистрировались все особенности течения заболевания. С целью определения специфических антител в крови больных использовали непрямую реакцию иммунофлюоресценции (НРИФ) с корпускулярным антигеном Borrelia garinii sp.nov. (штамм Ip 21 производства НИИ ЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН). Положительным результатом НРИФ считали обнаружение специфических антител в разведении сыворотки 1:40 и выше. Для обнаружения специфической сенсибилизации лимфоцитов проводили реакцию торможения миграции лейкоцитов с боррелиозным антигеном (штамм Ip 21 производства НИИ ЭМ им. Н.Ф.Гамалеи РАМН). Иммунологическое исследование заключалось в определении в периферической крови количества Т-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана, в подсчете теофиллинрезистентных и теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов, иммунорегуляторного индекса (соотношение теофиллинрезистентных и теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов) ( Лебедев К.А., Понякина И.Д.,1983), в проведении реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) с ФГА и с КонА (“Serva”, ФРГ) ( Морозов В.Г.,Хавинсон В.Х.,1980). Состояние гуморального иммунитета оценивалось по количеству В-лимфоцитов методом иммунного розеткообразования с эритроцитами мыши, обработанными антителами и комплементом (Лебедев К.А., Понякина И.Д.,1983), и по содержанию иммуноглобулинов М, G, A в сыворотке крови методом радиальной иммунодиффузии (Mancini G.et al.,1965), уровню циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови (Гриневич Ю.А., Алферов А.Н.,1981). С целью выявления боррелий в очагах поражения окрашивали биоптаты кожи методом серебрения (по Левадити) наряду с классическим гистологическим исследованием. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Полученные нами данные при проведении клинического обследования показали, что у больных с очаговой склеродермией (морфеа) особенностью дерматологического статуса было преобладание бляшечной формы, распространенный характер поражения, наличие у одних и тех же больных очагов разной стадии развития, различная выраженность дерматосклероза и атрофии. У некоторых пациентов наблюдали сочетание с атрофодермией. У больных с атрофодермией Пазини-Пьерини дерматологический статус был представлен сливными очагами гиперпигментации, патологический процесс локализовался преимущественно в области спины и поясницы. В старых очагах участки пигментации сочетались с островковой белесоватой атрофией кожи, реже наблюдалось их западение. Явления дерматосклероза отсутствовали, за исключением больных, у которых отмечали сочетание с бляшечной склеродермией. Поражение кожи у больных с анетодермией носило диссеминированный характер с локализацией на туловище в виде небольших округлых очагов белесоватой атрофии кожи диаметром до 2 см., окруженных по периферии синюшным ободком. Лишь у одного больного, наряду с атрофическими элементами, были обнаружены грыжеподобные очаги. У двух больных обнаружено сочетание с лимфоцитомой кожи. У больных с хроническим атрофическим акродерматитом клинические проявления характиризовались ассиметричной диффузной отечной застойной эритемой с явлениями атрофии кожи на одной из конечностей. Дерматологический статус у обследованных больных с мигрирующей эритемой был представлен одиночным очагом в виде эритемы от бледно-розового до синюшно-красного цвета или кольцевидным пятном, величина очага варьировала от 5 до 30 см. При исследовании иммунологических показателей у больных основной группы до лечения было обнаружено достоверное снижение следующих показателей: абсолютного количества лимфоцитов (до 2.06±0.07х109/л), теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов (до 0.65±0.05х109/л), иммунорегуляторного индекса (до 1.48±0.13), и увеличение теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов (до 0,47±0.07х109/л) по сравнению с контрольной группой (здоровые лица) (р<0.5). У больных сравнительной группы до лечения определялось достоверное повышение лимфоцитов (до 2.30±0.09х109/л), Т-лимфоцитов (до 1.16±0.08х109/л) по сравнению с контролем (р<0.5). Сходные показатели определялись в сравнительной группе и после лечения. После лечения у больных основной группы было обнаружено достоверное увеличение абсолютного количества лимфоцитов (до 2.13±0.08х109/л), Т-лимфоцитов (до 1.15±0.03х109/л), отмечена тенденция к повышению теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов и снижению теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов (Табл. 1). Таблица 1. Показатели клеточного иммунитета у обследованных больных (А- при поступлении, В- после лечения, показатели представлены в абсолютных числах).

Больные Показатели	Основная группа n- 25	Сравнительная группа n- 25	Контрольная группа n- 25
Лейкоциты,109/л А В	5.62±0.11 5.60±0.1	5.86±0.14 5.85±0.12	5.76±0.12
Лимфоциты,109/л А В	2.06±0.07* 2.13±0.08#	2.30±0.09* 2.28±0.06	2.10±0.08
Т-лимфоциты109/л А В	1.11±0.02 1.15±0.03#	1.16±0.08* 1.18±0.06	1.09±0.05
Теофил.резист. Т-лимф. 109/л А В	0.65±0.05* 0.68±0.02	0.78±0.06 0.79±0.05	0.81±0.04
Теофил.чувств. Т-лимф. 109/л А В	0.47±0.07* 0.44±0.05	0.40±0.2 0.37±0.4	0.39±0.02
Иммунорегулятор- ный индекс А В	1.48±0.13* 1.45±0.12	1.95±0.09 2.14±0.11	2.08±0.10

Оценка значимости различий средних значений показателей: *- у больных основной и сравнительной групп до лечения с контрольной группой ( p<0,05) #- у больных основной и сравнительной групп до лечения и после лечения (p<0.05). По результатам РТМЛ с ФГА и КонА до и после лечения у больных основной группы обнаружено снижение функции Т-системы иммунитета по сравнению с группой контроля, при этом после лечения отмечалась достоверное (p<0.05) повышение функции Т-звена иммунитета (Табл. 2). Таблица 2. Показатели РТМЛ с ФГА и КонА (индексы миграции) у обследованных больных (А- при поступлении, В- после лечения).

Больные Показатели	Основная группа n- 25	Сравнительная группа n- 25	Контрольная группа n- 25
РТМЛ с ФГА % А В	92.8±1.11* 90.1±0.9#	39.1 ±1.6 38.7±1.1	38.9±0.9
РТМЛ с КонА % А В	112.2±2.5* 105.7±1.9#	50.1±0.8 49.6±1.6	49.8±1.3

Оценка значимости различий средних значений показателей *-у больных основной и сравнительной групп до лечения по сравнению с контролем (p<0.05); #-у больных основной и сравнительной групп до лечения и после лечения (p<0.05). Примечание: функциональную активность Т-лимфоцитов оценивали по феномену торможения (100% - миграционный индекс в %). При исследовании гуморального иммунитета до лечения было выявлено у больных основной группы достоверное увеличение количества В-лимфоцитов (до 0.64±0.09х109/л), у больных сравнительной группы до 0.62±0.07х109/л, по сравнению с группой контроля (0.54±0.03х109/л) (p<0.05). После лечения у больных основной группы отмечена тенденция к снижению, а у больных сравнительной группы - к повышению количества В-лимфоцитов (Табл. 3). Таблица 3. Количество В- лимфоцитов у обследованных больных(А- при поступлении, В- после лечения).

Больные Показатели	Основная группа n- 25	Сравнительная группа n- 25	Контрольная группа n- 25
В-лимфоциты109/л А В	0.64±0.09* 0.61±0.06	0.62±0.07* 0.65±0.09	0.54±0.03

Оценка значимости различий средних значений показателей *-у больных основной и сравнительной групп до лечения по сравнению с контролем (p<0,05); До лечения у больных основной группы выявлено достоверное повышение IgG (до 16.8±1.0г/л) и IgA (до 2.61±0.15г/л), а у больных сравнительной группы отмечено достоверное увеличение IgM (до 1.60±0.09г/л) и IgG (до 13.6±0.9г/л) по сравнению с контролем ( p<0.5). У большинства больных основной группы после лечения наблюдалось стойкое повышение IgG (в течение 3-х последующих месяцев), количество IgA постепенно снижалось до показателей контрольной группы. У больных сравнительной группы (ХМЭ) концентрация IgM и IgG к концу лечения оставалась повышенной. Повышенный уровень IgG сохранялся стойко в течение последующих 2-х месяцев Повышенные ЦИК обнаруживались только у единичных больных основной группы до лечения (Табл.4). Таблица 4. Показатели содержания иммуноглобулинов классов A,M,G и циркулирующих иммунных комплексов в крови обследованных больных (А- при поступлении, В- после лечения).

Больные Показатели	Основная группа n- 72	Сравнительная группа n- 48	Контрольная группа n- 30
JgM г/л А В	1.50±0.08 1.51±0.06	1.60±0.09* 1.71±0.07#	1.5±0.06
JgGг/л А В	16.8±1.0* 15.8±1.1#	13.6±0.9* 15.7±1.1#	10.8±0.27
JgA г/л А В	2.61±0.15* 1.91±0.13#	1.8±0.15 2.1±0.10	1.9±0.12
ЦИК, усл.ед. А В	61.2±3.2* 60.9±1.8	43.8±0.4* 44.1±0.9	35.8±3.5

Оценка значимости различий средних значений показателей *-у больных основной и сравнительной групп до лечения по сравнению с контролем (p<0,05); #-у больных основной и сравнительной групп до лечения и после лечения (p<0.05). Таким образом, при исследовании иммунного статуса до лечения у больных основной группы было обнаружено достоверное снижение абсолютного количества лимфоцитов, теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов, функции Т-лимфоцитов в РТМЛ с ФГА и КонА, повышение количества теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, IgG, IgA. Полученные результаты свидетельствуют о дисбалансе иммунной системы у этих больных (снижение хелперной и повышение супрессорной активности Т-лимфоцитов), на этом фоне вероятно ведущее место в иммунном ответе принадлежит гуморальному звену. После лечения у больных основной группы сохранялось повышенным абсолютное количество лимфоцитов, определено повышение Т-лимфоцитов, при этом отмечена тенденция к повышению количества теофиллинрезистентных Т-лимфоцитов, снижению теофиллинчувствительных Т-лимфоцитов и В- лимфоцитов, что свидетельствует об эффективности проведенной терапии и целесообразности применения иммуномодуляторов. Иммунологическое обследование больных сравнительной группы (ХМЭ) до лечения выявило достоверное повышение абсолютного количества лимфоцитов, Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов по сравнению с контрольной группой. После лечения была обнаружена тенденция к повышению В-лимфоцитов, достоверное повышение IgM и IgG. Полученные результаты, возможно отражают начало развития изолированного инфекционного процесса у больных с хронической мигрирующей эритемой. Результаты НРИФ с боррелиозным антигеном показали, что в основной группе до лечения положительные серологические реакции зарегистрированы в целом у 61,1% у больных (у 100% больных атрофодермией Пазини-Пьерини, у 100% -анетодермией, у 100%-ХААД, у 44%- очаговой склеродермией). Следует отметить, что при ХААД определялись высокие титры антиборрелиозных АТ (1:80- 1:640). В сравнительной группе до лечения положительная НРИФ отмечалась у 45,8% больных. По окончании лечения у всех сероположительных больных основной группы НРИФ оставалась положительной, а у 5 % больных имело место 2-х кратное нарастание титров. При этом у всех больных клинически сохранялись остаточные признаки заболевания. Через 3 месяца негативация НРИФ наблюдалась у 44,4 % больных основной группы. Через 6 месяцев у 94,4% пациентов этой группы отсутствовали диагностически значимые титры антиборрелиозных антител, однако у 5,6 % пациентов (3 больных с очаговой склеродермией, 1 больной с ХААД) положительная НРИФ оставалась без динамики (серорезистентность). По окончании лечения у 20,8% серонегативных больных мигрирующей эритемой выявлена положительная НРИФ. Через 3 месяца положительные титры антиборрелиозных антител определялись только у 8, 3 % больных МЭ. Через 6 месяцев у 4,2 % ( 2 человека) с мигрирующей эритемой положительная НРИФ не изменилась. Дальнейшее клинико-серологическое наблюдение сроком до 1 года за группой серорезистентных больных позволило выявить у двух пациентов появление свежих очагов бляшечной склеродермии, у двух - поражения нервной системы (энцефалопатия или радикулоневрит) и у двух больных с мигрирующей эритемой только серорезистентность без клинического рецидива (Рис.1). Рисунок 1. Динамика показателей НРИФ на фоне этиотропной терапии у обследованных больных Анализ полученных результатов РТМЛ с боррелиозным антигеном до лечения показывает, что у 15(60%) обследованных больных основной группы выявлена специфическая сенсибилизация лимфоцитов в виде стимуляции. В то же время у больных с мигрирующей эритемой (сравнительная группа) и в контрольной группе сенсибилизация к боррелиозному антигену отсутствовала. При сравнении результатов РТМЛ и НРИФ с боррелиозным антигеном сенсибилизация лимфоцитов выявлена у большинства больных с положительными результатами НРИФ. После проведенного лечения существенных изменений показателей специфической сенсибилизации лимфоцитов в РТМЛ с боррелиозным антигеном у обследованных больных не отмечено (p>0.5)(Табл.5). Таблица 5. Показатели РТМЛ с боррелиозным антигеном у обследованных больных (А- при поступлении, В- после лечения).

Больные Показатели	Основная группа n= 25	Сравнительная группа n=25	Контрольная группа n=25
РТМЛ с боррелиозным А антигеном, % В	135.4±3.5* 131.5±2.8#	92.5±2.9 94.2±3.1	95.4±3.4

Оценка значимости различий средних значений показателей *- у больных основной и сравнительной групп до лечения с контрольной группой ( p<0,05) #- у больных основной и сравнительной групп до лечения и после лечения (#- p<0,05). В качестве дополнительного метода диагностики боррелиозной этиологии заболевания у 22 больных использовался метод обнаружения возбудителя ИКБ в очаге поражения с помощью окрашивания серебром (по Левадити) биоптатов кожи. Боррелии обнаруживались у 11 из 19 обследованных больных основной группы, у больных ХМЭ боррелии были найдены только у одного больного, что свидетельствует о трудности нахождения спирохет в коже больных даже в раннюю стадию ИКБ (Табл.6). Таблица 6. Результаты гистологического исследования биоптатов кожи больных методом серебрения.

№№	Диагноз	Количество	Результаты
п/п		больных	боррелии обнаружены	боррелии не обнаружены
1.	Очаговая склеродермия	10	5	5
2.	Атрофодермия	5	3	2
3.	Анетодермия	4	3	1
4.	Хроническая мигрирующая эритема	3	1	2

Среди больных основной группы с наличием боррелий в очагах 2 пациента имели положительные результаты РТМЛ с боррелиозным антигеном при отрицательной НРИФ; в анамнезе больные отмечали укус клеща и дерматоз носил диссеминированный характер. В ходе наших исследований боррелии обнаруживались в сосочковом слое дермы или периваскулярно в виде одиночных или парных, черных извитых структур, длиной до 12-27.5 мкм и толщиной 0.2-0.3 мкм, четко отграниченных от окружающих тканей, на светло - коричневом фоне, при этом отдаленные участки дермы окрашивались в желтый цвет. Возможно, что локальное изменение окраски биоптатов кожи в месте нахождения боррелий связано с длительной персистенцией возбудителя. Нами были апробированы схемы комплексной терапии. Антибиотики назначались больным основной группы с положительной НРИФ или при наличии распространенного кожного процесса и соответствующего эпиданамнеза (укус клеща). Больные ХМЭ получали этиотропное лечение независимо от результатов НРИФ. Об эффективности проведенного этиотропного лечения судили по следующим основным критериям: клиническим (разрешение острых симптомов, появление пигментации и атрофии кожи, отсутствие новых очагов), лабораторным (снижение титра антиборрелиозных антител в НРИФ, снижение содержания иммуноглобулинов по сравнению с исходным результатом). Наиболее эффективным оказался пенициллин, доксициклин, цифран и ретарпен. Серорезистентность и рецидивы заболевания чаще наблюдали при назначении тетрациклина. При проведении этиотропной терапии предпочтение имели инъекционные препараты пенициллинового ряда- бензилпенициллин, при непереносимости его назначался доксициклин, реже- тетрациклин, амбулаторным больным рекомендовали ретарпен. При сочетании поражения кожи с нейроборрелиозом назначались препараты фторхинолонового ряда (цифран). Длительность применения антибиотиков зависела от давности заболевания и варьировала от 14 до 22 дней. Наряду с антибиотиками больные основной группы получали общепринятое для конкретной нозологической формы патогеническое лечение- аскорбиновую кислоту по 0.3 х 3 раза в день в течение месяца; сосудистые препараты (никотиновая кислота или компламин по 0.05 х 3 раза в день в течение месяца); витамин Е (100 мг.) по 1 капсуле 2 раза в день в течение месяца; в случаях выраженного дерматосклероза в очагах- фонофорез лидазы или ронидазы 8-10 сеансов. Важным звеном в комплексной терапии являлось назначение иммуномодуляторов. При изолированных кожных поражениях больные основной группы получали чаще тимоген, при сочетанных поражениях (энцефалопатия) - циклоферон, биолан. На фоне комплексной терапии у больных очаговой склеродермией исчезала воспалительная кайма по периферии очагов, уменьшался дерматосклероз, появлялась гиперпигментация кожи. У больных с атрофодермией в области гиперпигментированных сливных пятен развивалась белая атрофия кожи, “западение” очагов. Не отмечали значительных визуальных изменений в очагах при анетодермии и хроническом атрофическом акродерматите. У больных ХМЭ к концу лечения очаг разрешался полностью и только у единичных пациентов сохранялась пигментация на месте эритемы. Таким образом, проведенные исследования выявили дерматологические особенности поздних кожных пораженний ИКБ в Северо-Западном регионе, закономерности реагирования иммунной системы у больных с преимущественным поражением кожи на поздней стадии боррелиозной инфекции. Кроме того установлено, что НРИФ с боррелиозным антигеном является информативным доказательством боррелиозной природы изученных дерматозов и контролем эффективности лечения. Дополнительными методами диагностики поздних кожных поражений ИКБ может служить РТМЛ с боррелиозным антигеном и метод окрашивания серебром биоптатов кожи. ВЫВОДЫ: 1.        Поздние кожные поражения при иксодовом клещевом боррелиозе в Северо-Западном регионе России характеризуются выраженным клиническим полиморфизмом, проявляясь в виде различных форм морфеа, атрофодермии Пазини-Пьерини, анетодермии, хронического атрофического акродерматита. Дерматологический статус у этих больных отличается диссеминированным характером поражений, наличием у одних и тех же пациентов очагов на разных стадиях развития, с различной степенью выраженности дерматосклероза и атрофии. У 5 больных наблюдали сочетание очаговой склеродермии с атрофодермией, у 2 больных – анетодермии с лимфоцитомой кожи. 2.        Боррелиозная природа заболевания (по результатам НРИФ с боррелиозным антигеном) доказана у 60% больных очаговой склеродермией, у 100% - атрофодермией Пазини-Пьерини, у 100% - анетодермией, у 100% - хроническим атрофическим акродерматитом, при этом у части больных обнаруживаются астено-вегетативный синдром (31,9%), поражение опорно-двигательного аппарата (12,5%), нервной системы (12,5%), сердца (5,6%). 3.        С помощью метода серебрения биоптатов кожи боррелии обнаруживаются у 50% больных с очаговой склеродермией, у 60% - атрофодермией, у 75%-анетодермией. 4.        Дополнительным тестом доказательства боррелиозной этиологии поздних кожных поражений ИКБ может служить реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) с боррелиозным антигеном, специфическая сенсибилизация лимфоцитов определяется у большинства больных с положительными результатами НРИФ. 5.        Эффективными этиотропными средствами при изолированных кожных поражениях ИКБ оказались - пенициллин, доксициклин и ретарпен; при сочетанных поражениях - препараты фторхинолонового ряда (цифран); 6.        Комплексная терапии дерматозов боррелиозной этиологии должна включать общепринятое для конкретной нозологической формы патогенетическое лечение и иммуномодулирующие средства (тимоген, циклоферон, биолан); 7.        С целью оценки эффективности лечения и предупреждения рецидивов заболевания пациенты с дерматозами боррелиозной этиологии нуждаются после лечения в динамическом клинико - серологическом наблюдении в течение года. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 1. Для доказательства боррелиозной природы очаговой склеродермии, атрофодермии Пазини-Пьерини, анетодермии, в целях контроля эффективности этиопатогенетического лечения и предупреждения рецидивов заболевания необходимо использовать НРИФ, РТМЛ с боррелиозным антигеном. 2. В целях исключения поражения других органов и систем больные с поздними кожными проявлениями ИКБ должны быть осмотрены инфекционистом, по показаниям - невропатологом, терапевтом. 3. При изолированном поражении кожи ИКБ в качестве антибиотика необходимо применять пенициллин, доксициклин или ретарпен в течение 14-21 дней, при сочетанном поражении - цифран (ципринол) 0,5 х 4 раза в сутки, в течение 14-21 дней. Наряду с этиотропной терапией следует использовать адекватные патогенетические средства: иммуномодуляторы, сосудистые препараты, витамины А, Е, С. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ 1. К вопросу о серологической диагностике болезни Лайма // Тезисы докладов итоговой конференции военно-научного общества слушателей академии. - С-Пб., 1992, С.4. (в соавт.: Беляев С.Б., Кравченко П.Б.). 2. Об обнаружении специфических антител к возбудителю болезни Лайма у больных хроническим атрофическим акродерматитом // Тезисы докладов итоговой конференции военно-научного общества слушателей академии. - С-Пб., 1993, С.5 . (в соавт.: Беляев С.Б., Кравченко П.Б.). 3. О роли боррелий в этиологии очаговой склеродермии // Тезисы докладов итоговой конференции военно-научного общества слушателей академии. - С-Пб., 1994, С.6-7 . (в соавт.: Кравченко П.Б.,Завьялова О.К.). 4. Сравнительная оценка двух методов определения спонтанной инфицированности иксодовых клещей возбудителями болезни Лайма // Тезисы докладов итоговой конференции военно-научного общества слушателей академии.- С-Пб., 1995, С.5 . 5. Склеродермия и боррелиозная инфекция // Тезисы докладов итоговой конференции военно-научного общества слушателей академии. - С-Пб., 1996, С.7. (в соавт.: Корнилов Ю.Н.). 6. Спектр кожных поражений при Лайм-боррелиозе в Северо-Западном регионе России // Тез. докл. международной научной конф. "Вирусные, риккетсиозные и бактериальные инфекции, переносимые клещами". - Иркутск, Б.И. - 1996. - С.132 . (в соавт.: Домасева Т.В., Козлов С.С., Белугина Е.Е.). 7. Клиника и диагностика дерматозов боррелиозной природы, их отношение к болезни Лайма. // Тез.докл. 7-го Всероссийского съезда дерматовенерологов.- Казань,"Медицина".- 1996. - С.36 . (в соавт.: Домасева Т.В., Козлов С.С., Шаршембиев Д.О., Корнилов Ю.В., Гаврюченков Д.В.). 8. Результаты НРИФ с боррелиозным антигеном при лимфомах кожи // Тезисы докладов итоговой конференции военно-научного общества слушателей академии. С-Пб., 1997, С.9 . 9. Материалы по изучению дерматозов боррелиозной природы // Журнал дерматовенерологии и косметологии – 1997. - №2. – С.28-31 . (в соавт.: Домасева Т.В., Козлов С.С., Самцов А.В., Поляков И.А., Белугина Е.Е.). 10. Dermatological features of Lyme borreliosis in Nord West region of Russia. // 4th European congress of chemotherapy infectious diseases, May 23-25, 1996 Athens, Greece / Abstracts. - N218. - P.115 . (Yu.:T.V.Domaseva, S.S.Kozlov, D.V.Kazakov). 11. К вопросу о диагностике и лечении дерматозов боррелиозной природы // Тез. докл. 32-й науч.- практич конференции дерматовенерологов акушер-гинекологов и урологов. – СПб, Б.И.. – 1997. – С.26 . (в соавт.: Домасева Т.В., Козлов С.С.). 12. Уровень сывороточных иммуноглобулинов у больных с кожными проявлениями Лайм-боррелиоза // Актуальные вопросы медицинской паразитологии V Всеросс. науч. конференция / Тезисы докладов. - СПб, Б.И., 1998. - С.180 . (в соавт.: Пасхина М.Н., Козлов С.С., Домасева Т.В.).