Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Ульяновский педагогический университет им.И.Н.Ульянова.
Реферат на тему:

«ПРИОНЫ»
                                         Выполнила: студентка 5 курса

                                                             Естественно-географического факультета

               Логинова Л.А.

                                                           Проверила: Попова Лариса Михайловна
Ульяновск 2010г.
                           

 О Г Л А В Л Е Н И Е
Историческая справка…………………………………………………………………...  2
Понятия и термины……………………………………………………………………...    5
Структура прионных белков……………………………………………………………  6
Физико-химические свойства прионов………………………………………………...8
Прионный ген……………………………………………………………………………    9
Биологические особенности прионов…………………………………………………..  12
Заключение……………………………………………………………………………….    13
Список литературы………………………………………………………………………
ИСТОРИЧЕСКАЯ СПРАВКА

      Проблема прионных болезней родилась в рамках учения о  медленных

инфекциях, когда в 1954 г. B.Sigurdsson изложил результаты своих

многолетних исследовании массовых заболеваний среди овец, завезенных на о.

Исландия из Германии в 1933 г. для  развития каракулеводства. Несмотря на

явные клинические различия и неодинаковую локализацию повреждений органов и

тканей, B.Sigurdsson сумел обнаружить среди изученных им заболеваний

принципиальное сходство, которое в современном виде может быть суммировано

в виде четырех главных признаков, отличающих медленные инфекции:

      • необычно продолжительный (месяцы и годы) инкубационный период;

      • медленно прогрессирующий характер течения;

      • необычность поражения органов и тканей;

      • неизбежность смертельного исхода.

      Среди изученных B.Sigurdsson заболеваний овец была подробно

исследована давно и хорошо знакомая во многих странах болезнь этих

животных, известная под названием "скрепи".

      Три года спустя в противоположном регионе – на о. Новая Гвинея –

D.C.Gajdusek и V.Zigas (1957) обнаружили и описали новое заболевание среди

папуасов-каннибалов, которое известно сегодня под названием "куру". Болезнь

носила массовый характер и вскоре была доказана ее инфекционная природа.

      Благодаря исследованиям W.Hadlow (1959) было выявлено большое сходство

между клиническими проявлениями, эпидемиологическими показателями и

патоморфологической картиной куру у человека и скрепи у овец, на основании

чего стало очевидным, что медленные инфекции могут поражать не только

животных, но и людей.

      Массовый характер медленных инфекций, естественно, ставил вопрос об их

этиологии, и начавшиеся энергичные поиски в этом направлении вскоре

принесли свои плоды.

      Следует особо подчеркнуть, что, начиная с сообщений B.Sigurdsson, в

литературе постепенно накапливались данные об особой группе медленных

инфекций человека и животных, патоморфологические признаки которых весьма

существенно отличались выраженным своеобразием, проявляющимся только в

поражении центральной нервной системы, в которой на основе первично-

дегенеративных процессов (без признаков воспаления) развивается характерная

картина формирования так называемого губкообразного состояния серого и/или

белого вещества головного, а иногда и спинного мозга, что может

сопровождаться образованием амилоидных бляшек и выраженным глиозом.

      Подобное своеобразие патоморфологической картины определило и

первичное (и до сих пор используемое) название всей группы этих необычных

болезней – "трансмиссивные губкообразные энцефалопатии" (ТГЭ). Именно

трансмиссивность губкообразных изменений только в центральной нервной

системе и является их патогномоничным признаком.

      На протяжении нескольких десятилетий все попытки обнаружить

возбудителей ТГЭ заканчивались неудачей, хотя инфекционная природа их была

точно доказана многочисленными опытами передачи заболеваний различным

животным и не вызывала сомнений.

      Вместе с тем на протяжении этих лет накапливались данные, которые не

прямо, но косвенно позволяли судить по крайней мере о некоторых свойствах

возбудителей ТГЭ. И первые же положительные результаты подтвердили

правильность или во всяком случае эффективность вирусологического подхода в

изучении этиологии ТГЭ.

      Не имея возможности работать с самим этиологическим агентом,

исследователи предприняли разностороннее изучение инфицированной мозговой

ткани, наивысшее содержание инфекционного агента в которой было давно

установлено. При этом оказалось, что предполагаемый инфекционный агент

обладает следующими свойствами:

      • способен проходить через бактериальные фильтры с диаметром пор от 25

до 100 нм;

      • не способен размножаться на искусственных питательных средах;

      •  воспроизводит  феномен  титрования  (вызывает   гибель   зараженных

животных при высоких значениях ИД5о);

      • накапливается до титров 105 - 1011 на 1 г мозговой ткани;

      • способен первоначально репродуцироваться в селезенке и других

органах ретикулоэндотелиальной системы, а затем в мозговой ткани;

      • способен к адаптации к новому хозяину, что нередко сопровождается

укорочением инкубационного периода;

      • характеризуется наличием генетического контроля чувствительности у

некоторых хозяев (например, у овец и мышей для возбудителя скрепи);

      • имеется специфический круг хозяев для данного штамма возбудителя;

      • может регистрироваться изменение патогенности и вирулентности у

разных штаммов для различного круга хозяев;

      • возможна селекция штаммов из дикого типа;

      • возможно воспроизведение феномена интерференции (например, медленно

репродуцирующегося штамма возбудителя скрепи с быстро репродуцирующимся

штаммом в организме мышей);

      • возможна персистенция в культуре клеток, полученных из органов и

тканей зараженного организма.

      Однако наряду с приведенными признаками у возбудителей ТГЭ были

обнаружены свойства, которые отличались от таковых у известных вирусов.

Так, возбудители ТГЭ оказались устойчивыми к действию бета-пропиолактона,

формальдегида, глутаральдегида, ЭДТА, нуклеаз (РНКазы А и III, ДНКазы I),

псораленов, нагревания до 80°С (при неполной инактивации в условиях

кипячения), УФ-лучей, ионизирующей радиации, ультразвука. Более того, ни

одним из инфекционных материалов, полученных от животных или людей,

погибших от ТГЭ, долгое время не удавалось заразить интактные клеточные

культуры.

      Перечисленные своеобразные свойства дали основание рассматривать

возбудителей ТГЭ как "необычные вирусы". В связи с этим и сами заболевания

некоторое время подразделяли на две группы: медленные инфекции, вызываемые

обычными вирусами, и медленные инфекции, вызываемые необычными вирусами.

      Однако в начале 80-х годов эти нечеткие определения были значительно

конкретизированы, а в дальнейшем и уточнены, что целиком и полностью

связано с успехами в расшифровке природы возбудителей ТГЭ. Американский

биохимик Стэнли Прузинер, используя новые подходы к накоплению и очистке

инфекционного начала в мозговой ткани зараженных хомяков, показал, что

возбудителем наиболее распространенной в природе ТГЭ – скрепи (заболевание,

которое в природе встречается среди овец и коз) – является безнуклеиновый

низкомолекулярный (27–30 кДа) белок, который он назвал "инфекционный

прионный белок". В качестве инфекционной единицы С. Прузинер предложил

наименование "прион". Термин "прион" образован как анаграмма английских

слов "белковая инфекционная (частица)" – "proteinaceous infectious

(particles)".

     
ПОНЯТИЯ И ТЕРМИНЫ
      Понятия и термины. Постепенное накопление фактов, все более полно

характеризующих особенности прионных болезней и их возбудителей,

естественно, порождали появление новых терминов и понятий, которые, конечно

же, будут использованы при дальнейшем изложении материалов в этой книге и

поэтому нуждаются в специальном объяснении.

      Прион – малая белковая инфекционная частица, устойчивая к

инактивирующим воздействиям, которые модифицируют нуклеиновые кислоты.

Прионы по большей части или исключительно состоят из молекул инфекционного

прионного белка и вызывают ТГЭ у человека и животных.

      PrP – прионный белок.

      PrPSc _ инфекционный прионный белок, который вызывает скрепи (scrapie)

у овец и коз и другие прионные болезни животных и человека. Однако,

учитывая, что скрепи является наиболее распространенной в природе прионной

болезнью, для обозначения инфекционности прионного белка использованы

первые буквы названия заболевания – "Sc" (scrapie).

      PrPC – неинфекционный прионный белок, который носит наименование

"клеточный" и в этом случае "С" – начальная буква английского слова cell

(клетка). Неинфекционный (клеточный) прионный белок является жизненно

необходимым белком, обнаруживаемым в организме всех млекопитающих, включая

и человека. Одной из отличительных черт клеточного прионного белка является

его высокая чувствительность к переваривающему действию протеазы К, под

действием которой PrPC полностью разрушается.

      PrP 27(30 – инфекционный прионный белок, сохраняющийся в результате

переваривающего воздействия протеазы К на исходный инфекционный прионный

белок PrPSc. Его молекулярная масса в результате гидролитического

воздействия протеазы К снижается лишь незначительно и сохраняется на уровне

27–30 кДа.

      PRNP– ген, кодирующий синтез клеточного прионного белка (PrPC в

организме человека, локализованный на хромосоме 20.

      Prnp – ген, кодирующий синтез клеточного прионного белка (PrPC в

организме мыши, локализованный на хромосоме 2.

      Прионные палочки – белковые структуры, выявляемые в мозговой ткани

зараженных животных или человека и представляющие собой главным образом или

исключительно агрегированные молекулы инфекционного прионного белка (PrP

27–30), сформированные в результате экстракции детергентами и ограниченного

протеолиза исходного инфекционного прионного белка (PrPSc). Морфологически

и гистохимически прионные палочки неотличимы от многих амилоидных структур.

      PrP-амилоидные бляшки – амилоидные бляшки, состоящие из прионного

белка, обнаруживаемые в мозговой ткани животных или людей, погибших от

прионных болезней.

      Конформационные белки – белки, у которых в результате изменений

третичной или даже четвертичной структуры меняются некоторые свойства.
                       
  СТРУКТУРА ПРИОННЫХ БЕЛКОВ
      Установленные необычные свойства возбудителей ТГЭ послужили основанием

для выдвижения большого количества разнообразных теорий, пытающихся

объяснить структуру и химическую природу этих агентов, многие из которых

теперь имеют лишь историческое значение. Резкий скачок вперед в понимании

природы возбудителей ТГЭ был сделан в результате разработок эффективных

методов очистки и концентрации агента скрепи. Существенный вклад в

разработку таких методов внесла группа Стенли Прузинера из Калифорнийского

университета (США). Разработанная им многоступенчатая система очистки

позволила получить препараты, очищенные в 100 – 1000 раз. На основании

изучения высокоочищенных препаратов авторы пришли к выводу о том, что

возбудитель скрепи является белком. Этот вывод был сделан в результате

анализа инактивации агента при его обработке протеазой К, модификации при

воздействии диэтилпирокарбонатом, додецилсульфатом натрия,

гуанидинтиоцианатом, фенолом и мочевиной. Агент оставался устойчивым к

обработке рядом реагентов, инактивирующих нуклеиновые кислоты, что

указывало на их отсутствие в его составе. Изучение очищенного препарата

возбудителя скрепи показало, что он обладает молекулярной массой около или

меньше 50 000 Да.

      Следует отметить, что представление о прионной природе возбудителя

скрепи, выдвинутое С.Прузинером, оказалось очень плодотворным и послужило

основанием для более детального распознавания природы возбудителей ТГЭ. В

результате дальнейшей очистки приона было показано, что его основным

компонентом является мажорный белок с молекулярной массой 27000 –  30000

Да, обозначаемый как РrР 27–30. Этот белок является составной частью скрепи-

ассоциированных фибрилл, причем получены структурные и биохимические

свидетельства того, что сборка этих фибрилл происходит in vivo, и изучены

некоторые молекулярные механизмы их образования. По своей физико-химической

характеристике РrР представляет собой сиалогликопротеин и является первым

идентифицированным структурным компонентом приона скрепи. Появление РrР

27–30 на этапе развития инфекции до развития гистопатологических изменений

указывало на то, что этот белок не является вторичным продуктом

патологической реакции. Был сделан вывод о том, что РrР 27–30 играет

центральную роль в патогенезе скрепи.

      При дальнейшем изучении прионов, выделенных из головного мозга

зараженных скрепи животных, было выявлено наличие в ЦНС частиц в виде

стержней диаметром 10 – 20 нм и длиной 100 – 200 нм. Ультраструктурно они

напоминали амилоид и, по-видимому, представляли собой полимерную форму

приона скрепи; каждый стержень содержал около 1000 молекул приона. Был

проанализирован аминокислотный состав PrP 27–30 и определена

последовательность 15 аминокислотных остатков в его полипептидной цепи. В

последующем из головного мозга зараженных скрепи хомяков был выделен

мажорный белок с молекулярной массой 33–37 кДа, обозначенный как HaSp

33–37; его выделение проводилось без этапа обработки протеазами. Обработка

HaSp 33–37 протеазой К приводила к получению продукта, электрофоретически

неотличимого от РrР 27–30. Была определена последовательность 22

аминокислотных остатков HaSp 33–37. Авторы полагали, что HaSp 33–37

представляет собой интактную форму белка возбудителя скрепи. Были изучены

также некоторые другие характеристики прионов скрепи и болезни

Крейтцфельдта–Якоба. В частности, при изучении липосом было подтверждено

предположение о том, что инфекционная частица скрепи содержит 2 молекулы

PrPSc и показано наличие вставок в ген приона при семейных случаях болезни

Крейтцфельдта–Якоба и синдрома Герстманна–Штреусслера–Шейнкера.

      Важным шагом, имеющим как теоретическое, так и методическое значение,

 было   получение   антител   при   использовании   в   качестве   антигенов

 высокоочищенных прионов скрепи. В сыворотках кроликов, иммунизированных РrР

 27–30, определяли антитела,  специфически  реагирующие  с  РrР  27–30  и  с

 несколькими белками с более низкой молекулярной массой, очевидно,  имеющими

 общую антигенную детерминанту с РrР 27–30 или  являющимися  продуктами  его

 расщепления.    Полученные    антисыворотки    не    взаимодействовали    с

 соответствующими  белками,  выделенными  из  головного   мозга   нормальных

 незараженных животных. Используя полученную антисыворотку  с  пероксидазной

 меткой,  удалось  показать  локализацию  прионов  в  определенных   отделах

 головного мозга зараженных животных. В  соответствии  с  ранее  полученными

 данными   структуры,   связанные   с   меченой   антисывороткой,   обладали

 характеристикой амилоидных бляшек. Получение и использование  антисыворотки

 к синтетическому пептиду, соответствующему N-концевой части приона  скрепи,

 позволили  провести  индикацию  белка  скрепи-ассоциированных   фибрилл   в

 головном мозге, селезенке и лимфатических узлах  зараженных  животных.  При

 этом положительные результаты были получены на ранних этапах инкубационного

 периода скрепи.

      Развитие представлений о прионной природе возбудителя скрепи позволило

сделать еще один решающий шаг в познании природы этих необычных агентов. В

1985 г. группе исследователей удалось выделить и охарактеризовать ген,

кодирующий PrP 27–30. Оказалось, что этот ген содержится в ДНК, выделенной

из мозга как скрепи-инфицированных, так и нормальных животных;

соответственно м РНК для PrPC была обнаружена в головном мозге и в других

тканях как инфицированных скрепи, так и нормальных животных. Используя

соответствующую антисыворотку, удалось показать, что в тканях незараженных

животных содержится белок, антигенно родственный PrP 27–30, но отличающийся

от него чувствительностью к обработке протеазой К. Были получены

доказательства того, что PrPC не кодируется гипотетической нуклеиновой

кислотой агента. Эта точка зрения поддерживается в работах R.M.Ridley,

H.F.Barker (1997). На основе этих данных были изучены биогенез и

трансмембранная ориентация клеточной изоформы белка приона скрепи.
                     ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ПРИОНОВ
      Физико-химические свойства прионных белков особенно интенсивно

изучались в последние годы, в результате чего были сформированы

представления и получены новые данные о первичной, вторичной и третичной

структуре PrP. Так, при анализе первичной структуры PrPC различных видов

животных было выявлено, что 80% последовательностей PrPC у разных видов

животных были идентичными. Исключение составлял куриный PrPC, где

идентичность последовательностей по отношению к другим видам составляла

всего 30%. Тем не менее 24 аминокислотные последовательности,

располагающиеся между 112-м и 135-м аминокислотными остатками, являются

высококонсервативными для всех видов млекопитающих, а также кур. В

частности, было показано, что конверсия нормального прионного белка PrPC в

его инфекционную форму (PrPSc) является посттрансляционным процессом.

Анализ вторичной структуры PrPSc выявил, что этот переход характеризуется

большими структурными изменениями самого приона. Продемонстрировано, что

PrPC содержит 42% (-спиралей и почти не содержит (-тяжей (около 3%), в то

время как в его инфекционной форме PrPSc выявляется 30% (-спиралей и 43% (-

тяжей. В экспериментальных исследованиях было подтверждено, что обработка

нормального PrPC реагентами, уменьшающими образование (-тяжей, также

приводит к уменьшению инфекционности приона; одновременно снижается и

устойчивость к действию протеазы К, чувствительность к которой является

маркером, отличающим PrPC от PrPSc.

      Проведенный сравнительный анализ показал, что конформационные различия

между нормальным и инфекционным прионным белком заключаются в трехмерной

конформации. Переход нормального PrPC в его патологическую форму имеет в

своей основе перестройку укладки белка. Корреляция изменений во вторичной

структуре PrP с изменениями его инфекционности вместе с изменением

конформации PrP дает основания заключить, что конформация прионного белка

может иметь главное значение для проявления его патогенных свойств.

      Были изучены некоторые закономерности перехода клеточной формы приона

PrPC в его инфекционную форму и выявлено, что эффективность этой конверсии

определяется видовой гомологией PrPC и PrPSc и, следовательно, в условиях

гетерологичности обеих форм прионного белка эффективность конверсии

снижается. Этим и объясняется механизм низкой инфекционности прионов в

гетерологичной системе (например, животные – человек). Значение этой

конверсии в развитии инфекционного процесса было подчеркнуто в

экспериментальных исследованиях, показавших, что мыши, не экспрессирующие

PrPC, устойчивы к инфекции прионами.

      В исследованиях in vitro, проведенных на модели агентов ТГЭ, также

была установлена корреляция между эффективностью конверсии PrPC в PrPSc и

способностью к трансмиссии агентов скрепи, губкообразной энцефалопатии

коров и болезни Крейтцфельдта – Якоба. Было продемонстрировано, что

конверсия PrPC в PrPSc в гетерологичной системе значительно снижена по

сравнению с гомологичной системой. Авторы делают из своей сугубо

экспериментальной работы практически важный вывод о том, что способность

агентов скрепи и губкообразной энцефалопатии коров поражать людей после

соответствующей экспозиции является ограниченной и низкой.

      Таким образом, в результате разносторонних исследований, особенно

интенсивно проводившихся в 90-е годы, были получены и систематизированы

имеющие принципиальное значение данные о структуре и физико-химических

свойствах прионных белков. Получение и анализ этих сведений создали

необходимые предпосылки для дальнейшего углубленного изучения биологических

особенностей прионных белков и механизма развития вызываемых ими

заболеваний людей и животных.
                                ПРИОННЫЙ ГЕН
      Современный этап в исследовании молекулярных основ прионных

заболеваний человека и животных связан с идентификацией гена, кодирующего

прионный белок. Расшифровка аминокислотной последовательности этого белка,

позволила выяснить структуру кодирующей области соответствующего гена. Этот

ген, получивший название PRNP, был вскоре выделен и исследован в

лаборатории Ч.Вэйссманна. Выделение гена PRNP позволило использовать для

исследования этиологии и патогенеза прионных заболеваний весь арсенал

современных методов молекулярно-генетического анализа. В настоящее время

структура белка PrP и соответствующего гена известна для многих организмов.

Ген PRNP оказался эволюционно-консервативным: он найден у многих

млекопитающих и птиц. В структурном отношении гены PRNP млекопитающих тоже

схожи: в генах всех млекопитающих область, кодирующая PrP, локализована

только в одном экзоне (экзоны - области гена, представленные в структуре

зрелой иРНК). У человека этот ген локализован на хромосоме 20, у мышей - на

хромосоме 2. Ген PRNP присутствует и экспрессируется не только у больных,

но и у здоровых животных. При этом, несмотря на то, что иРНК гена PRNP в

тканях мозга взрослых животных экспрессируется конститутивно, у молодых

животных ее количество меняется с возрастом. Наибольшее количество иРНК

PRNP зарегистрировано в нейронах.

      Примерно 10% всех прионных заболеваний человека относятся к так

называемым семейным формам или болезням с наследственной

предрасположенностью. Идентификация прионного гена позволила связать

семейные формы этих заболеваний с конкретными мутациями в гене PRNP. Так,

например, мутация, вызывающая замену пролина на лейцин в 102-м положении

PrP оказалась связана с развитием синдрома Герстманна-Штреусслера-Шейнкера.

Интересно, что эта мутация приводит к заболеванию не только людей, но и

мышей. Мутация в 178-м кодоне может быть связана как с развитием болезни

Крейтцфельдта-Якоба (БКЯ), так и смертельной семейной бессонницы.

Интересно, что оба случая связаны с заменой аспарагиновой кислоты на

аспарагин. Разница, по всей видимости, заключается в том, что мутантная

аллель при смертельной семейной бессоннице в 129-м положении несет кодон

для метионина, в то время как в случае БКЯ это положение занимает кодон для

валина. Наследственная предрасположенность к прионным заболеваниям может

быть связана не только с определенными аминокислотными заменами в PrP, но и

с его гораздо более существенными изменениями. Так, в аминоконцевом районе

PrP имеется 5 расположенных подряд идентичных последовательностей из 8

аминокислот. Некоторые формы семейной БКЯ оказались связанными с

увеличением количества таких повторов. Механизм образования этих повторов

неясен. Однако понятно, что в отличие от случаев, описанных ранее, они

возникли не за счет точковых мутаций, а в результате рекомбинационных

событий. Всего в настоящее время в гене PRNP человека известно около 20

мутаций, связанных с семейными формами прионных заболеваний.

      У животных аллельный полиморфизм по гену PRNP тоже связан с

вероятностью развития прионных болезней. Тем не менее вопрос о том, влияют

ли изменения в структуре этого гена на вероятность спонтанного заболевания

животных или они связаны с подверженностью животных прионным инфекциям,

остается открытым.

      Важной особенностью прионов как инфекционных агентов является наличие

межвидовых барьеров на пути их передачи, хотя PrP лишь незначительно

отличается по первичной структуре у разных видов млекопитающих. В

большинстве случаев эти барьеры не абсолютны, иными словами, они не

препятствуют, а лишь значительно затрудняют передачу инфекции от особей

одного вида особям другого вида. Вместе с тем известно по крайней мере одно

исключение из этого правила: у кроликов не удается вызвать заболевание

после заражения их инфекционным прионным белком, выделенным из мозга самых

разных животных. Хотя причина устойчивости кроликов к прионной инфекции

точно неизвестна, анализ структуры гена, кодирующего PrP кролика, показал,

что она может быть связана с некоторыми особенностями первичной структуры

этого белка.

      Существенный прогресс в исследовании прионов стал возможным после

передачи скрепи мышам и хомякам. Как уже было упомянуто, делеция гена PRNP

не приводит к немедленной смерти животных. Это позволило установить, что

особи, лишенные гена PRNP, не заражаются прионами и, вероятно, вообще не

подвержены этим заболеваниям. Интересно, что в подобных экспериментах было

показано, что удаление аминоконцевой последовательности PrP мыши за счет

делеции соответствующей области гена PRNP не препятствует развитию прионных

заболеваний. Ранее было отмечено, что некоторые семейные формы БКЯ связаны

с увеличением количества аминокислотных повторов в этой области белка PrP

человека. Таким образом, эти изменения влияют на вероятность заболевания,

хотя его наличие не является критичным для прионного превращения белка.

      Увеличение экспрессии гена PRNP (количество PrP) способствует

возникновению заболевания. В силу существования межвидовых барьеров мыши

устойчивы к заражению прионами, выделенными из мозга больных хомяков, но

трансгенных мышей, несущих ген PRNP хомяка, легко заразить с помощью

инокуляции суспензии клеток мозга больного хомяка. Все перечисленные факты

полностью согласуются с теорией о белковой природе прионов. Животные,

лишенные гена PRNP, не заболевают просто потому, что их клетки не содержат

белка, подверженного конформационной перестройке. При увеличении количества

молекул этого белка должна возрастать вероятность спонтанного перехода

какой-либо из молекул в патогенную форму. Существование наследственной

предрасположенности к прионным заболеваниям связано с тем, что мутации

увеличивают вероятность прионного превращения белка PrP. Менее выраженная

способность к инфицированию у "чужого" приона при межвидовом заражении

может объясняться пониженной способностью PrPSc передавать свое патогенное

состояние PrPC несколько отличающемуся от него по первичной структуре.

      Итак, возможность заражения особей одного вида с помощью прионов,

выделенных из тканей мозга особей другого вида, способствовала

использованию лабораторных животных (мышей и хомяков) для изучения природы

прионов и вызываемых ими болезней. В то же время отсутствие межвидовых

барьеров на пути распространения прионов означает принципиальную

возможность их передачи от животных человеку. Действительно, в последнее

время проблема прионов приобрела существенное практическое значение в связи

со вспышками соответствующих эпизоотии среди сельскохозяйственных животных

в некоторых европейских странах, а также с появлением наблюдений о

возможности передачи этих заболеваний от животных человеку. В настоящее

время получен ряд серьезных свидетельств, указывающих на опасность

заражения человека прионами животных. При этом наиболее убедительные

доказательства базируются на результатах, полученных с использованием

трансгенных лабораторных животных.
     Открытие С. Прузинера заставило ученых говорить о новом типе наследственности - прионной, белковой наследственности, т.е. передача информации может происходить не только через химическую структуру генов. В настоящее время существование такой наследственности доказано как отечественными, так и зарубежными учеными. Для нас особенно важно, что здесь наблюдается передача от белка к белку структурной, трехмерной информации, в которой может кодироваться пространственная организация живых организмов (строение нашего тела, индивидуальные анатомические особенности разных людей, народов и рас).

Яркий пример - проведенные еще в первой половине XX века опыты по скрещиванию породистых лошадей с более выносливыми копытными животными - зебрами. Когда после ряда неудачных скрещиваний с зебрами-самцами кобыл вновь перевели на конезаводы, то у них от породистых жеребцов стали рождаться жеребята с окрасом, повторяющим вертикальные полосы зебры, чего у нормальных лошадей никогда не наблюдалось.
                      БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПРИОНОВ
      В последние годы вопрос о биологическом значении PrPC был подвергнут

ревизии. На мышах, гомозиготных по потере гена PrPC, было показано, что эти

животные после рождения росли нормальными, но спустя 70 нед у них

развивались прогрессирующие симптомы атаксии, нарушалась моторная

координация и отмечалась экстенсивная потеря клеток Пуркинье. Авторы

сделали вывод о том, что PrPC играет важную роль в выживании клеток

Пуркинье. Помимо этого, указывается на роль PrPC в регуляции циркадианных

ритмов, на возможное участие PrPC в активации лимфоцитов и на его роль в

качестве трофического фактора для некоторых популяций нейронов. Сохранность

PrPC имеет значение для реализации нормальной функции синапсов. В последние

годы опубликованы данные, свидетельствующие о роли PrPC в регуляции сна и

продемонстрировано значение нарушения нормальной функции PrPC в

возникновении смертельной семейной бессонницы. В исследованиях in vitro

было также показано, что PrPC вовлекается в процессы регуляции содержания

внутриклеточного Са2+ в нейронах,  Интенсивные исследования биологической

роли PrPC позволили прийти к заключению о значении нормального приона PrPC

в сохранении резистентности нейронов и астроцитов к окислительному стрессу.

      Таким образом, за последние годы были значительно расширены

представления о биологической значимости PrPC. Было установлено, что PrPC

синтезируется в эндоплазматической сети и довольно быстро деградирует:

продолжительность его полураспада составляет всего 5 – 6 ч. Синтезированный

PrPC, проходя через аппарат Гольджи, транспортируется на поверхность

клетки, где он связывается с гликофосфатидилинозитолом. Синтезированный

PrPC в дальнейшем переносится вдоль аксона при помощи быстрого

антероградного транспорта. В отличие от PrPC инфекционный прионный белок

PrPC первично аккумулируется в клетках, накапливаясь в цитоплазменных

везикулах. Дальнейшее накопление PrPSc в синаптических структурах и

связанная с этим дезорганизация синапсов, возможно, являются причиной

развития глубоких неврологических дефектов и деменции.

      Напомним, что заболевания, вызываемые прионами, характеризуются рядом

признаков, сочетание которых определяется биологическими особенностями их

возбудителей, это прежде всего длительный инкубационный период (от месяцев

до десятков лет), отсутствие воспалительных изменений, хронически

прогрессирующая патология, отсутствие ремиссий и выздоровления. Для

прионных болезней характерен ряд отрицательных признаков, которые не

наблюдаются при заболеваниях, вызываемых вирусами. К ним относятся

отсутствие продукции интерферона и нечувствительность к интерферону,

отсутствие в составе возбудителя инфекционных нуклеиновых кислот и

неспособность прионов интерферировать с вирусами. Для прионных болезней

характерны нечувствительность к иммуносупрессирующему или

иммунопотенцирующему действию АКТГ, кортизона, циклофосфамида, (-лучей,

антилимфоцитарной сыворотки, тимэктомии и спленэктомии, отсутствие влияния

адъювантов. Для прионных болезней характерна также интактность В- и Т-

клеток. Комбинация всех перечисленных признаков, каждый из которых не

является чем-то уникальным, и определяет своеобразие прионных болезней.

      Получение новых данных в отношении биологических особенностей прионов

позволило заключить, что прионные болезни являются нейродегенеративными

заболеваниями, в возникновении которых фундаментальную роль играют

конформационные изменения, а сам механизм развития болезни является

беспрецед

    ЗАКЛЮЧЕНИЕ
      Изучение прионов и вызываемых ими заболеваний является новой, быстро

развивающейся областью биомедицинских исследований. Проблема этих болезней,

оставаясь до последнего времени экзотической в связи с их большой редкостью

в человеческой популяции, в последние годы приобрела важное научно-

практическое значение.

      Практический интерес связан прежде всего с разразившейся эпизоотией

губкообразной энцефалопатии коров в Великобритании, а также с выявлением, в

основном в Великобритании, молодых людей с болезнью Крейтцфельдта-Якоба

(новый вариант БКЯ) и доказательством возможности передачи этого

заболевания людям в результате употребления в пищу мясопродуктов,

полученных из зараженных животных. И хотя для населения России нет прямой

угрозы заражения инфекционным прионным белком, на современном этапе важным

является налаживание в общегосударственном масштабе работы по регистрации

прионных болезней человека и животных на всей территории страны с

обращением особого внимания на группы риска (работники скотоводческих и

звероферм, боен, мясокомбинатов и др.).

      Постоянно увеличивающийся теоретический интерес к проблеме обусловлен

результатами молекулярно-биологических исследований прионов, позволивших

собрать и уже в большой мере систематизировать значительный фактический

материал о структуре, функции и накоплении в зараженном организме этих

новых и необычных возбудителей инфекционных заболеваний человека и

животных.

      Именно результаты молекулярно-биологических исследований структуры

прионных белков дали основание наметить новые направления в дальнейших

подходах к терапии прионных болезней.

      В заключение следует подчеркнуть, что все возрастающий мировой интерес

к прионам и прионным болезням обусловлен в первую очередь  тем,  что  прионы

представляют собой совершенно новый  класс  инфекционных  агентов,  открытие

которых без преувеличения можно сравнить  по  своему  значению  с  открытием

А.Левенгуком мира микроорганизмов или  с  открытием  Д.И.Ивановским  царства

вирусов.
                     С П И С О К     Л И Т Е Р А Т У Р Ы
    1. Зуев В.А., Завалишин И.А., Ройхель В.М.  Прионные болезни человека и

       животных: Руководство для врачей. – М., 1999.
    2. Покровский В.И., Киселев О.И. Молекулярные основы прионных болезней.

       // Вестн. РАМН. – 1998. - № 10.
    3. Борисов Л.В. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. –

       М., 2001.